استخلاص ال DNA
أ/ RBC lysiss تكون كمية المحلول 3 أضعاف حجم العينة :
1/ 5 مل دم توضع في انبوب 50 مل ذو الغطاء البرتقالي أو الأزرق
1/ 5 مل دم توضع في انبوب 50 مل ذو الغطاء البرتقالي أو الأزرق
2/ نضيف 15 مل من rbc lysiss solution
3/ نضعها 10 دقائق على جهاز الشيكر في درجة حرارة الغرفة .
4/ نعمل لها طرد مركزي "centrifuge " ثلاثة آلاف دورة لمدة 15 دقيقة .
5/ نحتفظ بالراسب وقليل من الرائق , ثم نتخلص من باقي الرائق .
6/ نخلطها بواسطة جهاز الرج "vortex" لمدة 40 ثانية .
ب/ Cell lysiss solution نفس كمية العينة :
1/ نضيف 5 مل من cell lysiss بواسطة الـ pipette .
2/ نخلطها بواسطة جهاز الرج "vortex" لمدة 10 دقائق ثم نضعها على جهاز الشيكر (إذا كان هناك تجلط , فلابد أن
نضعها في الحمام المائي درجة 65 لمدة ساعة إلى أن يختفي التجلط , أو نتركها في درجة حرارة الغرفة يوم كامل على جهاز الشيكر )
ملاحظة : تترك العينات على جهاز الشيكرحد أدنى نصف ساعة وحد أعلى ساعة ونص
0 التعليقات:
إرسال تعليق